EGTA溶液 (500mM, pH8.0)の作り方

EGTA溶液は実験室でも頻繁に使用される試薬です。EGTAはethylene glycol tetraacetic acidの略でエチレングリコール四酢酸です。似たような試薬としてEDTAがありますが、どちらもキレート剤として使用され。自分は実際にはカルシウムのキレート剤として使用していました。

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EGTAとEDTAの違い

EGTAとEDTAを比較すると以下の表のようになるかと思います。ポイントはEGTAはCaに対して選択性が高い、ということだと思います。

EGTAをそのまま溶かしていくと徐々に水溶液が酸性になるのですぐに溶けなくなります。一方でNaOHを加えてアルカリ性にしていくと溶ける。実際のところあまり原理については詳しくないのですが、化学に詳しい方はもっと詳しく説明できると思います。

EGTA19gを測ってビーカーへ
ミリQ 80mL入れる、この時点では溶けない
スターラーを投入し混ぜる
NaOHを少しずつ投与、酸性の状態では溶けないはずなので、色が薄くなったら慎重に入れる。
pH測定器があれば測定しながらNaOHを投与できる。pHが上がり始めたら一気に8近くまで上昇するので注意。そうも行かない場合は、色が透明になってきてからリトマス紙でチェック、色は勘で判断する
pH8.0になっていればメスシリンダーに移し、100mLまでミリQ をいれメスアップ
オートクレーブ後は室温保存でOK、すぐ使い切るならオートクレーブは省略していました

	EGTA	EDTA
分子量	380.35g/mol	292.2438 g/mol
化学式	C₁₄H₂₄N₂O₁₀	C₁₀H₁₆N₂O₈
構造式	by wikipedia	by Wikipedia
選択性	特にCa2+, Cd2+に対して選択性高い	Ag+, Ca2+, Mg2+, Cu2+, Fe3+, Zr4+など
溶解度	<3.8mg/mL in DMSO 水やエタノールに溶けにくい	0.05g/100mL in H2O 水やエタノールにほとんど溶けない Na塩などではもう少し溶ける
価格	¥22500/100g*	¥9000/500mL (0.5M pH8.0)*